國蘭莖尖組織培養技術

中國蘭新芽發展期正值南邊高溫高溼的多雨季候，雜菌繁衍瘋狂，泥土、介質中帶菌尤其嚴重。供接種取樣的蘭盆介質應盡少帶雜菌，不施有機肥，放置在透光避雨處，當新芽初露時即讓幼芽裸器上面。取6～l3公分長的新芽，從植株基部切高，用刮刀除去根、贓物和外包葉2～3片，充實洗淨後將材料再切取2～3公分長，在lO％次氯酸的藥液中消毒lO分鐘。如帶菌嚴重，應用O．il%昇汞和飽和漂白粉上清波交叉消毒。滅菌後用無菌水沖刷數次，再放到滅菌濾紙上吸乾水許，然後在剖解鏡下無菌操作利取莖尖和腋芽。若是以去病毒爲目標，所剝取的莖尖應在o．2毫米以下，不然可剝取2毫米以上莖類，帶2個葉原基，有利於成活。

（－）、原球莖的誘導

蘭花各個部份的離體組織部能誘導形成原球莖，再經分化培育形成植株。－旦形成原球莖後，就可以不竭朋分繼隊培育增殖起來，也就是成立了無性滋生系。蘭花的原球莖生命カ強，遺傳性狀不變，對快速滋生及種質資本留存極其有利。

外植體接種後放置在23－25度的暗中前提下培育，l～2＋月後可分比出l至數個乳白色的原球莖，在剖解鏡下不雅察近似桑果外形的園球突起，今後轉綠，再經培育易呈根狀莖（或呈樹枝狀的叢生形），。影響蘭花原球莖誘導成功的身分有：

l、品種的影響：分歧品種因爲遺傳類型、內源激素和多酚類物質含量等囚素的差別，誘導啓動的難度也不盡不異。#p#分頁標題#e#

2、培育基的影響：各品種對分歧培育基的順應水平紛歧樣。春蘭類品種以white＋ba。＋naa5＋公分8．5％和bll+ba＋naa2爲好。“夏蕙”、“秋素”等則以ms＋baO.5＋naal＋活性炭O.5％的培育基爲好。初步不雅察，春蘭品種順應以無機鹽濃度和氨態氮含量低，而發展素含量高的培育基。“夏蕙”、“秋素”等品種則順應無機鹽濃度較高、發展素含量較低的培育基。

3、新芽氏度及材料類此外影響：莖尖不管啓動率和成功率均高於測芽以9～l3公分的新芽誘導，成功率最高。

4、誘導啓動後褐變滅亡的影響：國蘭品種的莖頂接種後成活並膨大呈桑果狀原球莖因爲啓動，成功率尚好，但啓動後輕易褐變滅亡，是國蘭組培掉敗的原因之－。據四川農科院生物手藝研究所的資料，褐變滅亡數幾近佔3／4。因爲國蘭芽端具有較多的多酚氧化酶，經莖項培育易褐化而滅亡，如採取較大的外植體接種，降低培育溫度、暗培育、儘可能削減傷□面和在培育基中附加褐變按捺劑（經常使用抗氧化劑，如芸香苷，檸檬酸等），或共同應用活性炭等，有減輕褐變滅亡的結果。

（ニ）、蘭科植物多經由過程原球莖路子分化形成植株。熱帶蘭原球莖多呈園球狀，國蘭的原球莖則呈叢生狀（根狀莖）。原球莖形成階段是蘭花大量滋生的有利階段，是快速滋生，提高增殖率的主要環節。莖尖，側芽接種3～6個月後，根狀莖形成時便可朋分繼代，增殖培育基以w和bll爲根基培育基，附加naal～2的液體培育基爲好。放置在漫轉速轉牀上加光培育（l～2轉／分），每隔l5天改換－次培育基，持續繼代3～4次後，ㄡ轉入不異成份，附加有活性炭（O．3％）和檸檬酸（5OOmg/l）的固體培育基，每個月繼代－次。液培、固培瓜代進行。增殖培育中，原球莖的朋分不成太小。培育羣體不宜太少。培育液則不成過量。繼代培育時候不成太長，不然原球莖發展不良，乃至滅亡。原球莖可以不竭地再朋分、增殖，如許就成立了無性系。國蘭原球莖的繼件次數和時候還有待摸索，但從已繼代3～5年的原球莖來看，仍連結正常的增殖和分比能カ。